Biopolymers and Cell 1990; 6(2) P 38-45
ИЗУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ В ЭКСТРАКТАХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ
А. Т. Ахмедов, Е. А. Намсараев, Е. М. Зайцева, Е. Н. Зайцев, В. А. Ланцов
Институт ядерной физики им. Б. П. Константинова АН ССР, Ленинград
Описана бесклеточная система, в которой используются экстракты ядер миелобластов человека, клеток HeLa и семенников крыс для инициации рекомбинации между гомологичными плазмидами, несущими различные мутантные аллели Тс-гена. Инкубация этих плазмид с ядерными экстрактами увеличивала частоту Tсr-рекомбинантов с 2,6-IO-5 до 2,7 -IO3. Реакция требует ионов Mg2+ и не зависит от присутствия ATP и dNTP. Кроме того, использовав чувствительный метод определения реакции переноса нити, мы частично очистили ATP-независимую рекомбиназную активность из ядерных экстрактов семенников крыс. Реакция требует гомологии между ДНК-субстратами и присутствия ионов Mg2+ . |
|