Biopolymers and cell. 2010; 26 (2): 153 - 159
Последствия РНК-интерференции генов убиквитина и протеасомной субъединицы 7 в культуре неонатальных кардиомиоцитов
В. А. Кириченко, В. С. Нагибин, Л. В. Тумановская, В. К. Рибальченко, В. Е. Досенко, А. А. Мойбенко
Цель. Учитывая значительную роль убиквитин-зависимого протеасомного протеолиза (УПП) в регуляции белков, контролирующих запрограммированную клеточную гибель (апоптоз, аутофагия), цель работы состояла в исследовании способности кардиомиоцитов к выживанию при специфическом заглушении генов убиквитина (UBB) и протеасомной субъединицы 7 (PSMB7), отвечающей за сборку 26S протеасомы. Методы. Применены методы РНК-интерференции (для заглушения генов UBB и PSMB7), флуоресцентной микроскопии и полимеразной цепной реакции в реальном времени. Результаты. Показано, что заглушение генов UBB и PSMB7 снижает их экспрессию в 2,4 (Р < 0,05) и 1,6 раза (Р > 0,05) соответственно, при этом увеличивается количество клеток, погибших вследствие некроза, без изменения уровня апоптических клеток. Содержание клеток с признаками аутофагии значительно возрастает из-за нарушения функционирования УПП и накопления большого количества внутриклеточных белков, деградирующих в результате лизиса. Выводы. Полученные данные свидетельствуют о том, что заглушение генов UBB и PSMB7 индуцирует некротическую и аутофагическую гибель кардиомиоцитов, не влияя на количество апоптических клеток.
Ключевые слова: убиквитин, протеасома, РНК-интерференция, кардиомиоциты