Biopolym.cell_Summary_2011; 27(4):285-290

Цель. Охарактеризовать иммортализованную клеточную линию 293 после стабильной трансфекции онкогена CHI3L1. Методы. Клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1_CHI3L1, и клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1 в качестве отрицательного контроля, использованы во всех экспериментах. Клоны 293_CHI3L1 и клетки 293_pcDNA3.1 анализировали методами иммунофлюоресценции и конфокальной микроскопии. Клеточную пролиферацию определяли с помощью MTT, активацию и локализацию ERK1/2 и AKT анализировали с применением анти-фосфо-ERK и анти-фосфо-AKT-антител. Специфическую активацию MAPи PI3-киназ определяли денситометрическим анализом Вестерн-блот сигналов. Результаты. Полученные результаты демонстрируют умеренную способность CHI3L1 стимулировать клеточный рост и отражают скорее повышенную способность к прикреплению клеток, стабильно трансфецированных pcDNA3.1_CHI3L1 по сравнению с 293-клетками, трансфецированными «пустым» вектором. ERK1/2 и AKT в клетках 293_CHI3L1 находятся в активированном состоянии. В этих клетках фосфорилированныe ERK1/2 локализованы как в цитоплазме, так и в ядре, в то время как AKT – только в цитоплазме. Клетки 293_CHI3L1 отличаются от клеток 293_pcDNA3.1 по морфологии и способности прикрепления к культуральным чашкам. Выводы. Сверхэкспрессия CHI3L1, очевидно, имеет важное значение в опухолеобразовании и опосредуется активацией PI3K и MAPK-сигнальных путей. Опухоли, которые индуцируются ортотопической имплантацией трансформированных человеческих клеток со сверхэкспрессированным CHI3L1 в мозг крыс, могут служить мишенью для антираковой терапии.

Цель. Охарактеризовать иммортализованную клеточную линию 293 после стабильной трансфекции онкогена CHI3L1. Методы. Клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1_CHI3L1, и клетки 293, стабильно трансфецированные pcDNA3.1 в качестве отрицательного контроля, использованы во всех экспериментах. Клоны 293_CHI3L1 и клетки 293_pcDNA3.1 анализировали методами иммунофлюоресценции и конфокальной микроскопии. Клеточную пролиферацию определяли с помощью MTT, активацию и локализацию ERK1/2 и AKT анализировали с применением анти-фосфо-ERK и анти-фосфо-AKT-антител. Специфическую активацию MAPи PI3-киназ определяли денситометрическим анализом Вестерн-блот сигналов. Результаты. Полученные результаты демонстрируют умеренную способность CHI3L1 стимулировать клеточный рост и отражают скорее повышенную способность к прикреплению клеток, стабильно трансфецированных pcDNA3.1_CHI3L1 по сравнению с 293-клетками, трансфецированными «пустым» вектором. ERK1/2 и AKT в клетках 293_CHI3L1 находятся в активированном состоянии. В этих клетках фосфорилированныe ERK1/2 локализованы как в цитоплазме, так и в ядре, в то время как AKT – только в цитоплазме. Клетки 293_CHI3L1 отличаются от клеток 293_pcDNA3.1 по морфологии и способности прикрепления к культуральным чашкам. Выводы. Сверхэкспрессия CHI3L1, очевидно, имеет важное значение в опухолеобразовании и опосредуется активацией PI3K и MAPK-сигнальных путей. Опухоли, которые индуцируются ортотопической имплантацией трансформированных человеческих клеток со сверхэкспрессированным CHI3L1 в мозг крыс, могут служить мишенью для антираковой терапии.

Ключевые слова: слова: хитиназа 3-подобный белок 1 (CHI3L1), опухоли гoлoвного мозга, MAP-киназа, PI3-киназа