Biopolym. Cell. 1998; 14(3):238-241.
Генно-інженерна біотехнологія
Виділення і рестрикційний аналіз двох плазмід Streptomyces globisporus 1912
1Мацелюх Б. П., 1Лук'янчук В. В., 1Поліщук Л. В., 1Мацелюх А. Б., 2Рор Ю.
  1. Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680
  2. Інститут органічної і бімолекулярної хімії, Геттінгенського університету імені Георга-Августа
    Тамманштрассе, 2 Геттінген, Німеччина

Abstract

Сумарну плазмідну ДНК, виділену за допомогою лужної денатурації і нагрівання лізатів міцелію, очищено в східчастому градієнті щільності хлористого цезію і розділено на дві фракції електрофорезом у гелі звичайної і легкоплавкої агарози. Рестрикційний аналіз фракцій ДНК показав наявність двох плазмід pSG1912-I і pSG1912-2, розміри яких становлять 10,3 і 22,4 тис. пар нуклеотидів відповідно. Обидві плазміди стабільно виділяються із штамів стрептоміцета з різними рівнями споруляції та синтезу ландоміцину Е.

References

[1] Polishchuk LV, Dekhtyarenko TD, Stefanishin EE, Matselyukh BP, Kozyritskaya VE. Plasmids of globisporine groups Streptomycetes. Mikrobiol Zh. 1985; 47(4):83-8.
[2] Stefanishin EE, Dekhtiarenko TD, Polishchuk LV, Zaverukha VB, Matseliukh BP. Restriction analysis of plasmid pSG1912. Mikrobiol Zh. 1986;48(2):79-80.
[3] Zaverukha VB, Polevoda BV, Polishchuk LV, Matseliukh BP. The cloning of fragments of the streptomycete plasmid pSG1912 as a part of the vector pUC19. Mikrobiol Zh. 1992;54(5):30-5.
[4] Polishchuk LV, Hanusevych II, Matseliukh BP. The antitumor action of antibiotics produced by Streptomyces globisporus 1912 studied in a model of Gu?rin's carcinoma in rats. Mikrobiol Z. 1996;58(2):55-8.
[5] Matselyukh B, Polishchuk L, Rohr J. Plasmid-induced synthesis of antibiotics in Streptomycetes II Biol. Streptomycetes. Ohrbeck, 1996: 38.
[6] Kieser T. Plasmid isolation by alkaline lysis (Streptomyces or E. coli): procedure 2 II Genetic manipulation of Streptomyces. A laboratory manual. Norwich: The John Innes Found., 1985: 85-92.
[7] Dorin M, Bornecque CA. Fast separations of plasmid DNA using discontinuous gradients in the preparative ultracentrifuge. Biotechniques. 1995;18(1):90, 92.
[8] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.