Biopolym. Cell. 2007; 23(3):250-254.
Краткие сообщения
Экспрессия O6-метилгуанин-ДНК метилтрансферазы в клетках спонтанно иммортализованной линии G1 мыши и ее сублиний G1-OA и G1-T
1Яцышина А. П., 1Лыло В. В., 1Пидпала О. В., 1Рубан Т. А., 1Вагина И. Н., 1Лукаш Л. Л.
  1. Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины
    ул. Академика Заболотного, 150, Киев, Украина, 03680

Abstract

С помощью Вестерн-блот анализа проанализирована экспрессия гена Mgmt в клетках спонтанно иммортализованной линии G1 мыши и ее сублиний G1-OA и G1-T на разных пассажах культивирования in vitro. Самый высокий уровень экспрессии выявлен в клетках сублинии G1-T и наименьший – в клетках сублинии G1-OA. В клетках как исходной клеточной линии мыши G1, так и ее сублинии G1-OA наблюдали увеличение количества репаративного белка MGMT на более поздних пассажах культивирования in vitro. Поскольку для сублинии G1-OA характерны самые высокие частоты хромосомных аберраций, микроядерных и многоядерных клеток, можно предположить возможную роль дефицита репаративного фермента MGMT в повышении уровня хромосомных аберраций в сублинии G1-OA.
Keywords: клетки млекопитающих in vitro, O6-метилгуанин-ДНК метилтрансфераза (MGMT), хромосомные аберрации

References

[1] Pegg AE, Dolan ME, Moschel RC. Structure, function, and inhibition of O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol. 1995;51:167-223.
[2] Pegg AE. Repair of O(6)-alkylguanine by alkyltransferases. Mutat Res. 2000;462(2-3):83-100.
[3] Yuan Q, Matsumoto K, Nakabeppu Y, Iwaki T. A comparative immunohistochemistry of O6-methylguanine-DNA methyltransferase and p53 in diffusely infiltrating astrocytomas. Neuropathology. 2003;23(3):203-9.
[4] Harris LC, Remack JS, Houghton PJ, Brent TP. Wild-type p53 suppresses transcription of the human O6-methylguanine-DNA methyltransferase gene. Cancer Res. 1996;56(9):2029-32.
[5] Wolf P, Hu YC, Doffek K, Sidransky D, Ahrendt SA. O(6)-Methylguanine-DNA methyltransferase promoter hypermethylation shifts the p53 mutational spectrum in non-small cell lung cancer. Cancer Res. 2001;61(22):8113-7.
[6] Osanai T, Takagi Y, Toriya Y, Nakagawa T, Aruga T, Iida S, Uetake H, Sugihara K. Inverse correlation between the expression of O6-methylguanine-DNA methyl transferase (MGMT) and p53 in breast cancer. Jpn J Clin Oncol. 2005;35(3):121-5.
[7] Kaina B, Ziouta A, Ochs K, Coquerelle T. Chromosomal instability, reproductive cell death and apoptosis induced by O6-methylguanine in Mex-, Mex+ and methylation-tolerant mismatch repair compromised cells: facts and models. Mutat Res. 1997;381(2):227-41.
[8] Debiak M, Nikolova T, Kaina B. Loss of ATM sensitizes against O6-methylguanine triggered apoptosis, SCEs and chromosomal aberrations. DNA Repair (Amst). 2004;3(4):359-68.
[9] Bean CL, Bradt CI, Hill R, Johnson TE, Stallworth M, Galloway SM. Chromosome aberrations: persistence of alkylation damage and modulation by O6-alkylguanine-DNA alkyltransferase. Mutat Res. 1994;307(1):67-81.
[10] Kaina B, Fritz G, Coquerelle T. Contribution of O6-alkylguanine and N-alkylpurines to the formation of sister chromatid exchanges, chromosomal aberrations, and gene mutations: new insights gained from studies of genetically engineered mammalian cell lines. Environ Mol Mutagen. 1993;22(4):283-92. Review.
[11] Iatsyshyna AP, Pidpala OV, Kochubey TP, Lukash LL. Cytogenetic analysis of the spontaneously immortalized mouse cell line G1. Biopolym Cell. 2006; 22(4):299-306.
[12] Lukash LL, Iatsyshyna AP, Pidpala OV, Vagina IM, Kochubey TP. Establishment of new lines of murine stem cells and investigation of the influence of microenvironment on their karyotypical variability in vitro. Fiziologiia i biokhimiia kul'turnykh rasteniy. 2006; 38(2):144-52.
[13] Iatsyshyna AP, Pidpala OV, Ruban TP, Timoshchuk OV, Lukash LL. [Cytomorphological charasteristics of a novel mouse cell line G1]. Tsitol Genet. 2006;40(3):49-58.
[14] Russian cell culture collection (RCCC): Catalogue. Eds G. P. Pinaev, G. G. Poljanskaja, G. A. Sakuta, M. S. Bogdanova. St. Peterburg, Omsk, 1999. 204 p.
[15] Teo AK, Oh HK, Ali RB, Li BF. The modified human DNA repair enzyme O(6)-methylguanine-DNA methyltransferase is a negative regulator of estrogen receptor-mediated transcription upon alkylation DNA damage. Mol Cell Biol. 2001;21(20):7105-14.
[16] Sambrook J, Fritsh EF, Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab. press, 1989.
[17] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.
[18] Osterman LA. Methods of Protein and Nucleic Acid Research: Electrophoresis and ultracentrifugation. M.: Nauka. 1981; 288 p