Biopolym. Cell. 1985; 1(2):70-79.
http://dx.doi.org/10.7124/bc.000016
Клітинна біологія
Імуноморфологічне і біохімічне вивчення внутрішньоклітинної локалізації триптофаніл-тРНК-синтетази вищих організмів
1Палей Є. Л., 1Баранов В. Н., 2Зинов'єв Н. Є, 1Кісельов Л. Л.
  1. Інститут молекулярної біології АН СРСР
    Москва, СРСР
  2. Інститут канцерогенезу ВOНЦ АМН СРСР
    Москва, СРСР

Abstract

Досліджували внутрішньоклітинний розподіл триптофаніл-тРНК-синтетази (ТРС, КФ 6.1.1.2) у культивованих клітинах нирки великої рогатої худоби з використанням очищених моноспецифічних поліклональних, а також моноклональних антитіл до цитоплазматичного ферменту, застосовуючи світлову та електронну мікроскопію. Кількісний вміст ТРС у цитоплазмі клітин варіював у широких межах. Встановлено присутність ТРС на вільних полісомах і у вигляді великих скупчень в цитозолі, на полісомах, зв’язаних з мембранами гранулярного ендоплазматичного ретикулуму (ГЕР) і з зовнішньою ядерною мембраною. Продукт імуноцитохімічної реакції не виявлено в ядрах, мітохондріях, комплексі Гольджі і в області скупчення мікрофіламентів. При біохімічному дослідженні ізольованих мітохондрій з тканин бика, а також нормальних і пухлинних тканин людини стало можливим виявлення за допомогою імунопреципітації і імуноблотингу ТРС у цих органелах. Показано наявність загальних антигенних детермінант у цитоплазматичній і мітохондріальній ТРС людини і бика, хоча моноклональні антитіла виявляють між ними антигенну відмінність.
Повний текст: (PDF, російською)

References

[1] Kiselev LL, Favorova OO, Lavrik OI. Protein biosynthesis from amino acids to aminoacyl-tRNA. Moscow: Nauka, 1984. 408.
[2] Sheinker VSh, Favorova OO, Rokhlin OV. Immunochemical comparison of tryptophanyl-tRNA-synthetases. Mol Biol (Mosk). 1978;12(3):565-71.
[3] Beresten' SF, Sheinker VSh, Rokhlin OV. Immunochemical properties of tryptophanyl-tRNA synthetase and its fragments. Mol Biol (Mosk). 1978;12(6):1408-19.
[4] Beresten' SF, Zargarova TA, Kostrov SV, Favorova OO. Monoclonal antibodies against tryptophanyl-tRNA-synthetase. Mol Biol (Mosk). 1984;18(5):1407-11.
[5] Kisselev LL, Favorova OO, Kovaleva GK. Tryptophanyl-tRNA synthetase from beef pancreas. In: Methods in Enzymology. Eds. K. Moldave, L. Grossman. N. Y.: Acad, press, v. 59, p. 234-257.
[6] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[7] Wray W, Boulikas T, Wray VP, Hancock R. Silver staining of proteins in polyacrylamide gels. Anal Biochem. 1981;118(1):197-203.
[8] Osterman LA. Study of biological macromolecules electrofocussing, immunoelectrophoresis and radioisotope methods. Moscow: Nauka, 1983. 303.
[9] Gurvich AYe, Kuzovleva OB. Determination of the absolute amounts of antibodies and their allocation in the pure form by protein-cellulose complexes. In the book.: Immunochemical analysis. Ed. LA Zilber. M.: Medical, 1968. 300.
[10] Bustamante E, Soper JW, Pedersen PL. A high-yield preparative method for isolation of rat liver mitochondria. Anal Biochem. 1977;80(2):401-8.
[11] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.
[12] Papkoff J, Verma IM, Hunter T. Detection of a transforming gene product in cells transformed by Moloney murine sarcoma virus. Cell. 1982;29(2):417-26.
[13] Engelhardt NV, Baranov VN, Lazareva MN, Goussev AI. Ultrastructural localisation of alpha-fetoprotin (AFP) in regenerating mouse liver poisoned with CCL4. 1. Reexpression of AFP in differentiated hepatocytes. Histochemistry. 1984;80(4):401-7.
[14] Ordronneau P, Lindstrom PB, Petrusz P. Four unlabeled antibody bridge techniques: a comparison. J Histochem Cytochem. 1981;29(12):1397-404.
[15] Gaytskhoki V. S. Informational RNA of animal cells. M.: Medical, 1980. 199 p.
[16] Roberts WK, Olsen ML. Studies on the formation and stability of aminoacyl-tRNA synthetase complexes from Ehrlich ascites cells. Biochim Biophys Acta. 1976;454(3):480-92.
[17] Dang CV, Johnson DL, Yang DC. High molecular mass amino acyl-tRNA synthetase complexes in eukaryotes. FEBS Lett. 1982;142(1):1-6.
[18] Bhatnagar MK, Singh A. Ultrastructure of turkey hepatocytes. Anat Rec. 1982;202(4):473-82.
[19] AMontisano DF, Cascarano J, Pickett CB, James TW. Association between mitochondria and rough endoplasmic reticulum in rat liver. Anat Rec. 1982;203(4):441-50.
[20] Dean RT. Cellular degradative processes. London: Chapman and Hall, 1978. 120 p.
[21] Sprinzl M, Gauss DH. Compilation of tRNA sequences. Nucleic Acids Res. 1984;12 Suppl:r1-57.
[22] Maynolov S. E. Biochemical basis of malignancy. L.: Medical, 1971. 230.
[23] Luzikov VN Regulation of mitochondria formation. Moscow: Nauka, 1980. 317.
[24] Hay R, Bohni P, Gasser S. How mitochondria import proteins. Biochim Biophys Acta. 1984;779(1):65-87.
[25] Penneys NS, Muench KH. Tryptophanyl-tRNA synthetase of human skin. Clin. Res. 1971; 19(2):581-2.
[26] Penneys NS, Muench KH. Human placental tryptophanyl transfer ribonucleic acid synthetase. Purification and subunit structure. Biochemistry. 1974;13(3):560-5.
[27] Gabius HJ, Cramer F. Purification and subunit structure of phenylalanyl-tRNA synthetase from hen liver mitochondria. Biochem Biophys Res Commun. 1982;106(2):325-30.
[28] Colas B, Imbault P, Sarantoglou V, Weil JH. Immunological evidence for structural differences between Euglena Gracilis chloroplastic valyl- and leucyl-tRNA synthetases and their cytoplasmic counterparts. FEBS Lett. 1982;141(2):213-6.