Biopolym. Cell. 1997; 13(2):142-149.
Клітинна біологія
Засвоєння клітинами молікутів антисенсових аналогів олігодезоксирибонуклеотидів
1Егоров О. В., 1Панченко Л. П., 1Скрипаль І. Г., 2Амірханов Н. В.
  1. Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680
  2. НВП «Біосан»
    пр. ак. Лаврентьєва, 8, Новосибірськ, Російська Федерація, 630090

Abstract

Досліджено процеси зв'язування і поглинання клітинами Acholeplasma laidlawii PG-8, Mycoplasma fermentans PG-18 і M. pneumoniae FH тіофосфатних, дитіофосфатних та метил-фосфонатних аналогів олігодезоксирибонуклеотидів, компле­ментарних «сигнатурним» послідовностям 16S рРНК. Вияв­лено відмінності в ефективності зв'язування даними клітинами тіофосфатних та метилфосфонатних аналогів олігонуклеотидів. Так, рівень сорбції тіофосфатів клітинами A. laidlawii PG-8 перевищував такий метилфосфонатних ана­логів більше ніж в 5 разів. Встановлено факт значного нако­пичення клітинами молікутів тіо- і дитіофосфатних аналогів вивчених олігонуклеотидів. Внутрішньоклітинна концентрація цих сполук у досліджених штамів молікутів перевищувала позаклітинну в 104–105 разів. На основі отриманих еспериментальних даних зроблено припущення про наявність у клі­тинах молікутів двох різних механізмів поглинання аналогів олігонуклеотидів, що несуть від'ємний заряд в рибозофосфатному остові, та неіонних аналогів.

References

[1] Uhlmann E, Peyman A. Antisense oligonucleotides: a new therapeutic principle. Chem Rev. 1990;90(4):543–84.
[2] Skripal IG, Maalinovskaya LP. Medium for isolation and cultivation of phytopathogenic mycoplasmas. Mikrobiol Zh. 1984;46(2):71-5.
[3] Froehler BC, Ng PG, Matteucci MD. Synthesis of DNA via deoxynucleoside H-phosphonate intermediates. Nucleic Acids Res. 1986;14(13):5399-407.
[4] Yau EK, Ma Y-X, Caruthers MH. Synthesis of dinucleoside and dinucleotide phosphorodithioates via a phosphotriester approach. Tetrahedron Lett. 1990;31(14):1953–6.
[5] Amirkhanov NV, Zarytova VF. Reactive oligonucleotide derivatives bearing methylphosphonate groups. II. Synthesis of stereoregular octathymidylates containing an alkylating 4-(N-2-chloroethyl-N-methylamino)benzylamine group and alternating methylphosphonate residues. Bioorg Khim. 1989; 15 (2):267-76
[6] Yegorov OV, Panchenko LP, Skripal' IG. Study of sorption of antisense oligodesoxyribonucleotides of mycoplasma cells. Mikrobiol Z. 1996; 58(3):30-7.
[7] Godovikova TS, Zarytova VF, Mal'tseva TV, Khalimskaia LM. [Active derivatives of oligonucleotides with a zwitterionic terminal phosphate group for design of affinity reagents and probes]. Bioorg Khim. 1989;15(9):1246-52.
[8] Panchenko LP, Egorov OV, Ra?t AS, Ivanova EM, Amirkhanov NV, Zarytova VF, Vlasov VV, Skripal' IG. [The interaction of alkylating derivatives of oligodeoxyribonucleotides and their methylphosphonate analogs with Mycoplasma cells]. Mikrobiol Zh. 1991;53(4):63-8.
[9] Egorov OV, Panchenko LP, Skripal IG, Malinovskaya LP, Ryte AS, Ivanova EM, Vlasov VV. Binding efficiency of reactive oligodesoxyribonucleotides by the cells of different representatives of the class Mollicutes is conditioned by the age of the cultures. Mikrobiol Zh. 1992; 54(2):65-70.
[10] Zamecnik PC, Goodchild J, Taguchi Y, Sarin PS. Inhibition of replication and expression of human T-cell lymphotropic virus type III in cultured cells by exogenous synthetic oligonucleotides complementary to viral RNA. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83(12):4143-6.
[11] Razin S. The mycoplasmas. Microbiol Rev. 1978;42(2):414-70.
[12] Akhtar S, Basu S, Wickstrom E, Juliano RL. Interactions of antisense DNA oligonucleotide analogs with phospholipid membranes (liposomes). Nucleic Acids Res. 1991;19(20):5551-9.
[13] Miller PS. Biochemical and biological effects of nonionic nucleic acid methylphosphonates. Oligonucleotides. An tisense inhibitors of gene expression. Ed. J. S. Cohen. Lon don: MacMillan press, 1989;79-95.
[14] Kagava YA. Biomembranes. M. : Vyssh. shk., 1985. 303 p.
[15] Loke SL, Stein CA, Zhang XH, Mori K, Nakanishi M, Subasinghe C, Cohen JS, Neckers LM. Characterization of oligonucleotide transport into living cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 1989;86(10):3474-8.
[16] Maniloff J, Morowitz HJ. Cell biology of the mycoplasmas. Bacteriol Rev. 1972;36(3):263-90.