Biopolym. Cell. 2000; 16(6):559-561.
Молекулярна та клітинна біотехнології
Виділення сайт-специфічної ендонуклеази Streptomyces sp. 48
1Лук'янчук В. В., 1Суханов С. М., 1Поліщук Л. В., 1Мацелюх Б. П.
  1. Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 154, Київ, Україна, 03680

Abstract

Розроблено метод виділення і очищення сайт-специфічної ендонуклеази рестрикції II типу Streptomyces sp. 48. Було встановлено, що в лізаті міцелію штаму Streptomyces sp. 48 міститься тільки один фермент, який має сайт-специфічну ендонуклеазну активність. Максимальну елюцію ферменту зареєстровано при значенні іонної сили 350 мМ NaCL Представлений метод забезпечує достатнє очищення і концентрування ферменту із збереженням специфічної активності.

References

[1] Luk'ianchuk VV, Polishchuk LV, Stryzhkova HM, Kopie?ko OP, Matseliukh BP. The determination of the site specificity of type-II restriction endonuclease in Streptomyces sp. 48. Mikrobiol Z. 1999;61(1):80-3.
[2] Okanishi M, Suzuki K, Umezawa H. Formation and reversion of Streptomycete protoplasts: cultural condition and morphological study. J Gen Microbiol. 1974;80(2):389-400.
[3] Azeddoug H, Hubert J, Reysset G. Characterization of a methyl-specific restriction system in Clostridium acetobutylicum strain N1-4081. FEMS Microbiol Lett. 1989;53(3):323-6.
[4] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.
[5] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
[6] Luk'ianchuk VV, Stryzhkova HM, Polishchuk LV, Kopie?ko OP, Matseliukh BP. A search for site-specific type-II restriction endonucleases in streptomycetes. Mikrobiol Z. 1998;60(4):33-5.
[7] Belavin PA, Dedkov VS, Degtiarev SKh. A method for detecting restriction endonucleases in bacterial colonies. Prikl Biokhim Mikrobiol. 1988;24(1):121-4.