Biopolym. Cell. 1989; 5(2):51-58.
Дискусії
Експресія β-галактозидази Escherichia coli в гепатоцитах миші
1Костецький І. Є., 1Шпильова С. П., 1Ліхачева Л. І., 1Жарова Л. Г., 1Іродов Д. М., 1Кириллова В. С., 1Кордюм В. А.
  1. Інститут молекулярної біології і генетики АН УСРС
    Київ, СРСР

Abstract

Досліджено можливість перенесення гена бактерійної β-галактозидази (плазміда рGА293) у складі ліпосом безпосередньо в печінку двомісячних мишей лінії ВАLВ/с. Тестування продукта експрессії lасZ-гена проведено імунофлуоресцентним методом через 24 год після ін’єкції. Встановлено, що продукт експресії цього гена виявляється у 20–25 % гепатоцитів, про що свідчить поява яскравого свічення у цих клітинах. У варіантах з ін’єктуванням фізіологічного розчину, плазмід рGА293 і рGА293ZΔ без ліпосом, а також ліпосом, навантажених ДНК плазміди рGА293ZΔ, рівень флуоресценції гепатоцитів був низьким і порівнянним з таким у інтактних тварин. Експресія lacZ-гена відбувається з однаковою інтенсивністю у різних ділянках печінки і не залежить від місця введення. Індивідуальні тварини по-різному реагують у відповідь на введення чужорідного генетичного матеріалу.

References

[1] Mercola KE, Stang HD, Browne J, Salser W, Cline MJ. Insertion of a new gene of viral origin into bone marrow cells of mice. Science. 1980;208(4447):1033-5.
[2] Tomilin NV, Podgornaia OI, Abramian DS, Glebov OK. Genetic transformation of somatic cells. II. An analysis of the status of the plasmid nucleotide sequences in chromosomal DNA and the thymidine kinase activity in transformant clone cells. Tsitologiia. 1985;27(5):554-64.
[3] Louis DSt, Verma IM. Whole animal gene transfer. Gene transfer vectors mammalian cells: Banbury conf. Cold Spring Harbor (New York, October 14-17, 1987). New York, 1987: 94-102.
[4] Selden RF, Skoskiewicz MJ, Howie KB, Russell PS, Goodman HM. Implantation of genetically engineered fibroblasts into mice: implications for gene therapy. Science. 1987;236(4802):714-8.
[5] Dubensky TW, Campbell BA, Villarreal LP. Direct transfection of viral and plasmid DNA into the liver or spleen of mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(23):7529-33.
[6] Benvenisty N, Reshef L. Direct introduction of genes into rats and expression of the genes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83(24):9551-5.
[7] Margolis LB, Bergel’son LD. Liposomes and their interaction with cells. Moscow, Nauka, 1986; 240 p.
[8] Zakharyan RA. Transfer and transitory expression of HSV-I thymidine kinase gene in the composition of reconstructed virus-like and nucleoprotein complexes in the liver cells. Biopolym Cell. 1987; 3(4):215-220, 223.
[9] Stavridis JC, Psallidopoulos M. Use of transferrin as a gene-carrier to the erythroid cells of the marrow. Cell Mol Biol. 1982;28(1):15-8.
[10] Price J, Turner D, Cepko C. Lineage analysis in the vertebrate nervous system by retrovirus-mediated gene transfer. Proc Natl Acad Sci U S A. 1987;84(1):156-60.
[11] Manning EJ, Millson GC. Infectivity of liposomally encapsulated nucleic acids isolated from EMC virus and scrapie-infected mouse brain. Intervirology. 1983;20(2-3):164-8.
[12] Nicolau C, Le Pape A, Soriano P, Fargette F, Juhel MF. In vivo expression of rat insulin after intravenous administration of the liposome-entrapped gene for rat insulin I. Proc Natl Acad Sci U S A. 1983;80(4):1068-72.
[13] An G, Hidaka K, Siminovitch L. Expression of bacterial beta-galactosidase in animal cells. Mol Cell Biol. 1982;2(12):1628-32.
[14] Zilber A. Immunological analysis. Moscow, Medicine, 1968; 185 p.
[15] Seglen PO. Effects of amino acids, ammonia and leupeptin on protein synthesis and degradation in isolated rat hepatocytes. Biochem J. 1978;174(2):469-74.
[16] Coons AH, Leduc EH, Conolly JM. Studies on antibody production. I. A method for the histochemical demonstration of specific antibody and its application to a study of the hyperimmune rabbit. J Exp Med. 1955;102(1):49-60.
[17] Liposomes in Biological Systems. Eds G Gregoriadis, A Allison. Moscow, Medicine, 1983; 383 p.
[18] Giudice GJ, Fuchs E. The transfection of epidermal keratin genes into fibroblasts and simple epithelial cells: evidence for inducing a type I keratin by a type II gene. Cell. 1987;48(3):453-63.
[19] Earl PL, Moss B, Morrison RP, Wehrly K, Nishio J, Chesebro B. T-lymphocyte priming and protection against Friend leukemia by vaccinia-retrovirus env gene recombinant. Science. 1986;234(4777):728-31.
[20] Paterson RG, Lamb RA. Ability of the hydrophobic fusion-related external domain of a paramyxovirus F protein to act as a membrane anchor. Cell. 1987;48(3):441-52.
[21] Kazakova TB, Shatov VA, Verbina IA, Tsymbalenko NV, Kravtsov VD. Transformation of bone marrow cells in rodents by recombinant plasmid pBRSV. Tsitologiia. 1986;28(12):1345-50.