Biopolym. Cell. 1987; 3(2):59-65.
Структура и функции биополимеров
Локализация антигенных детерминант бычьей триптофанил-тРНК-синтетазы, узнаваемых моноклональными антителами
1Берестень С. Ф., 1Рубикайте Б. Й., 1Казаков В. К.
  1. Институт молекулярной биологии АН СССР
    Москва, СССР

Abstract

Используя ограниченное расщепление бычьей триптофанил-тРНК-синтетазы трипсином и BrCN, а также радиоиммуноадсорбцию и радиоиммуноблотинг, показано, что антигенная детерминанта для моноклональных антител Ам1 расположена на фрагменте с молекулярной массой 5000, а для АмЗ–9000 на N-конце молекулы синтетазы. Антигенная детерминанта для Ам2 находится внутри фрагмента 24 000, расположенного в середине полипептидной цепи молекулы фермента. После исчерпывающего расщепления под действием BrCN антигенная детерминанта сохраняется только для Ам1. С помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии выделен этот BrCN-фрагмент, содержащий 22–25 аминокислотных остатков. Триптические пептиды, а также пептиды, полученные расщеплением по остаткам аргинина, были антигенно неактивны для всех трех исследуемых моноклональных антител.

References

[1] Kisselev LL, Favorova OO, Kovaleva GK. Tryptophanyl-tRNA synthetase from beef pancreas. Methods Enzymol. 1979;59:234-57.
[2] Scheinker VS, Beresten SF, Mazo AM, Ambartsumyan NS, Rokhlin OV, Favorova OO, Kisselev LL. Immunochemical studies of beef pancreas tryptophanyl-tRNA synthetase and its fragments. Determination of the number of antigenic determinants and a comparison with tryptophanyl- tRNA synthetases from other sources and with reverse transcriptase from avian myeloblastosis virus. Eur J Biochem. 1979;97(2):529-40.
[3] Beresten' SF, Zargarova TA, Kostrov SV, Favorova OO. Monoclonal antibodies against tryptophanyl-tRNA-synthetase. Mol Biol (Mosk). 1984;18(5):1407-11.
[4] Beresten' SF, Rubikaite BI, Kiselev LL. Localization of antigenic determinants using monoclonal antibodies and alpha-NH2-terminal labeling of polypeptide chains. Bioorg Khim. 1986;12(3):316-26.
[5] Zargarova TA, Beresten' SF, Favorova OO, Kiselev LL. Tryptophanyl-tRNA-synthetases of eukaryotes, prokaryotes and archebacteria have a common antigenic determinant. Dokl Akad Nauk SSSR. 1985;285(6):1484-6.
[6] Means GE, Frency RE, San Francisco et al. Acylating and similar reagents. Chemical modification of proteins: Holden Day. Inc., 1971:68-104.
[7] Prasolov VS, Favorova OO, Margulis GV, Kisselev LL. Limited proteolysis of the tryptophanyl-tRNA synthetase. Biochim Biophys Acta. 1975;378(1):92-106.
[8] Smyth D. G. Techniques in enzymic hydrolysis. Methods Enzymol. 1967; 11:214-231.
[9] Beresten S, Scheinker V, Favorova O, Kisselev L. Mutual conformational changes of tryptophanyl-tRNA synthetase and tRNATrp in the course of their specific interaction. Eur J Biochem. 1983;136(3):559-70.
[10] Gross E. The cyanogen bromide reaction. Methods Enzymol. 1967; 11:238- 255.
[11] Osterman LA. The study of biological macromolecules electrofocussing, immunoelectrophoresis and radioisotope methods. Moscow, Nauka, 1983; 304 p.
[12] Bolton A. E. Radioiodination techniques: Review 18. The Radiochemical Center. London: Amersham, 1977:70.
[13] Gros C, Lemaire G, Van Rapenbusch R, Labouesse B. The subunit structure of tryptophanyl transfer ribonucleic acid synthetase from beef pancreas. J Biol Chem. 1972;247(9):2931-43.
[14] Scheinker VS, Beresten SF, Degtyarev SK, Kisselev LL. The effect of tRNA and tryptophanyl adenylate on limited proteolysis of beef pancreas tryptophanyl-tRNA synthetase. Nucleic Acids Res. 1979;7(3):625-37.
[15] Kimura K, Mason TL, Khorana HG. Immunological probes for bacteriorhodopsin. Identification of three distinct antigenic sites on the cytoplasmic surface. J Biol Chem. 1982;257(6):2859-67.
[16] Grachev MA, Zelenin SM, Laktionov PP, Roshke VV. A simple method of determination of antigenic determinants in proteins with known primary structure. Bioorg Khim. 1986;12(1):81-8.