Biopolym. Cell. 2014; 30(1):74-76.
Короткі повідомлення
Кальцій/кальмодулін-залежне фосфорилювання ендоцитозного адаптора ITSN1
1Мордерер Д. Є., 1Ніколаєнко О. В., 1Скрипкіна І. Я., 1Римаренко О. В., 1Кропивко С. В., 1Циба Л. О., 1Риндич А. В.
  1. Державна ключова лабораторія молекулярної і клітинної біології
    Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
    вул. Академіка Заболотного, 150, Київ, Україна, 03680

Abstract

ITSN1 – це ендоцитозний адапторний білок, що виконує значущі функції у синаптичному передаванні нервового імпульсу. Відомо, що кальцієва сигналізація є ключовим елементом регуляції функціонування синаптичних білків. Мета. Дослідити можливість кальцій/кальмодулін-залежного фосфорилювання ITSN1. Методи. Афінна хроматографія, кіназна реакція in vitro, Вестерн блот-гібридизація, фарбування гелів флуоресцентними барвниками. Результати. Показано, що фракція кальмодулін-зв’язувальних білків здатна фосфорилювати рекомбінантні надспіралізовану та SH3 домен-вмісну ділянки ITSN1 in vitro за присутності іонів кальцію і кальмодуліну. Висновки. Надспіралізована та SH3 домен-вмісна ділянки ITSN1 підлягають кальцій/кальмодулін-залежному фосфорилюванню in vitro, що дозволяє припустити існування регуляції ITSN1 кальцієвою сигнальною системою.
Keywords: ITSN1, фосфорилювання, кальмодулін, кальцієва сигналізація

References

[1] Tsyba L., Nikolaienko O., Dergai O., Dergai M., Novokhatska O., Skrypkina I., Rynditch A. Intersectin multidomain adaptor proteins: regulation of functional diversity Gene 2011 473, N 2:67–75.
[2] O'Bryan J. P. Intersecting pathways in cell biology Sci. Signal 2010 3, N 152:re10.
[3] Tsyba L. O., Dergai M. V., Skrypkina I. Ya., Nikolaienko O. V., Dergai O. V., Kropyvko S. V., Novokhatska O. V., Morderer D. Ye., Gryaznova T. A., Gubar O. S., Rynditch A. V. ITSN protein family: regulation of diversity, role in signalling and pathology. Biopolym. Cell. 2013; 29, N 3:244–51.
[4] Ballif B. A., Villen J., Beausoleil S. A., Schwartz D., Gygi S. P. Phosphoproteomic analysis of the developing mouse brain Mol. Cell Proteomics 2004 3, N 11:1093–101.
[5] Dergai O., Dergai M., Skrypkina I., Matskova L., Tsyba L., Gudkova D., Rynditch A. The LMP2A protein of Epstein-Barr virus regulates phosphorylation of ITSN1 and Shb adaptors by tyrosine kinases Cell. Signal 2013 25, N 1:33–40.
[6] Pechstein A., Shupliakov O., Haucke V. Intersectin 1: a versatile actor in the synaptic vesicle cycle Biochem. Soc. Trans 2010 38, Pt 1:181–6.
[7] Kostyuk P. G. Key role of calcium signaling in synaptic transmission Neurophysiology 2007 39, N 4–5:248–50.
[8] Evergren E., Gad H., Walther K., Sundborger A., Tomilin N., Shupliakov O. Intersectin is a negative regulator of dynamin recruitment to the synaptic endocytic zone in the central synapse J. Neurosci 2007 27, N 2:379–90.
[9] Winther A. M., Jiao W, Vorontsova O., Rees K. A., Koh T. W., Sopova E., Schulze K. L., Bellen H. J., Shupliakov O. The dynamin-binding domains of Dap160/intersectin affect bulk membrane retrieval in synapses J. Cell. Sci 2013 126, Pt 4:1021–31.
[10] Nishimura T., Yamaguchi T., Tokunaga A., Hara A., Hamaguchi T., Kato K., Iwamatsu A., Okano H., Kaibuchi K. Role of numb in dendritic spine development with a Cdc42 GEF intersectin and EphB2 Mol. Biol. Cell 2006 17, N 3:1273–85.
[11] Wayman G. A., Lee Y. S., Tokumitsu H., Silva A. J., Soderling T. R. Calmodulin-kinases: modulators of neuronal development and plasticity Neuron 2008 59, N 6:914–31.