Biopolym. Cell. 2026; 42(Special Issue):104.
Інші трансляційні дослідження
Оцінка рівня експресії підданих впливу цитокініну з лікарських грибів Toll-подібних рецепторів типу 4 у пухлинних клітинах
- Навчально-науковий центр «Інститут біології та медицини»
Київського національного університету імені Тараса Шевченка
вул. Володимирська, 64/13, Київ, Україна, 01601 - Інститут ботаніки імені М.Г. Холодного, НАН України
вул. Терещенківська, 2, Київ, Україна, 01601
Abstract
Передумови/Мета. Лікарські гриби мають значний цитотоксичний, антипроліферативний та імуномодуляційний ефект проти різних видів раку завдяки численним біоактивним компонентам, зокрема рослинному росту регуляторів цитокініну. Біологічний механізм цих ефектів, ймовірно, пов'язаний з активацією імунної системи, ключовим білком якої є тол-подібні рецептори (TLR). Метою нашого дослідження було уточнити вплив екстрактів цитокініну з лікарських грибів на експресію TLR in vitro. Методи. Загальна РНК була виділена шляхом екстракції та вимірювання фенолхлороформу за допомогою ThermoScientific NanoDrop-1000. кДНК було отримано з повної РНК методом RT-PCR за допомогою «High Volume cDNA Reverse Transcription Kit». Експресія TLR-4 була оцінена компанією 7500 Real-Time PCR Systems із використанням спеціалізованих праймерів і флуорохрому SYBR Green. Екстракти цитокініну були очищені шляхом іонного обміну, а також тонкошарової хроматографії, проаналізованої системою HPLC-MS Agilent 1200. Рівень експресії TLR-4 було виявлено у клітинах гепатиту, гепатиту 2 (гепатокарцинома) та MT-4 (людський Т-клітинний лейкоз). Результати. Міцелій лікарських грибів із IBK Mushroom Culture Collection було отримано шляхом вирощування в середньо-рідкому поживному речовині. Загальний вміст цитокініну в біомасі міцелію був у діапазоні 14,49±0,49—70,22±2,32 нмоль/г DW. До інкубаційного середовища гепатиту G2 та MT-4 додавали фракції цитокініну. Фракції цитокініну, виділені з міцелію Pleurotus nebrodensis, Pleurotus osteratus та Sparassis crispa, стимулювали цю експресію TLR-4 у клітинах лімфоцитарного та гепатоцитного походження. Водночас фракції цитокініну з міцелію Morchella esculenta підвищили рівень експресії TLR-4 у клітинах MT-4 у 1,5 раза, тоді як у клітинах HepG2 їхній ефект був майже подібний до контрольних клітин. Як грубі екстракти, так і цитокінінові фракції, виділені з Flammulina velutipes, Cyclocybe aegerita та Hericium erinaceus, спричинили зміну експресії прозапальних цитокінів у клітинах MT-4. Вплив очищених фракцій на експресію TGF β (трансформуючий фактор росту β) був значно вищим порівняно з грубими екстрактами. Висновки. Вплив очищених екстрактів цитокініну, виділених із міцелію, відрізнявся залежно від клітинних ліній і сильно залежав від видів грибів. Їхній вплив на рівень експресії TLR-4 свідчить про імуномодуляторні властивості цих біологічно активних речовин у деяких клітинних лініях.
Keywords: лікувальні гриби, цитокініни, Toll-подібні рецептори
Повний текст: (PDF, англійською)
