Передумови/Мета. Застосування лігандів CRBN у проєктуванні деградаторів є одним із найвідоміших підходів під час розробки та оптимізації PROTAC [1]. Ця робота спрямована на дослідження ефективності синтезованих PROTAC CRBN:BRD4 з кіноліно-типом зв'язувачів як бойових частин, спрямованих на лігазу CRBN E3. Методи. Аналіз TR-FRET використовувався для оцінки зв'язування лігандів і біфункціональних деградаторів із білком CRBN. Формація тернарного комплексу між зацікавленим білком (POI), PROTAC та E3-лігазою, було оцінено за допомогою розробленого методу TCF TR-FRET [2]. Результати. Сполуки типу хіноліну були відібрані під час віртуального скринінгу та протестовані на здатність зв'язуватися з CRBN in vitro. Три потужні молекули продемонстрували значення IC₅₀ 1. 2 μM, 2.4 μM і 3.5 μM у тесті зміщення TR-FRET. Набір із 9 деградаторів PROTAC, заснованих на лігандах типу CRBN-типу хіноліну, було синтезовано хімічним відділом Enamine. Фермент BRD4 був обраний як POI, а його відомий зв'язуючий агент, JQ-1, слугує бойовою частиною конструкції деградатора. Синтезовані PROTAC тестувалися у бінарному тесті TR-FRET, у якому спостерігалося конкурентне зв'язування з комплексом CRBN/DDB1 з тестовим зразком частотою 1,11 мкм (n = 4) та Талідомідним зондом. Внаслідок цього 2 з 9 протестованих деградаторів зв'язували комплекс CRBN/DDB1 з інгібіторними значеннями >25% при зазначеній концентрації. Далі два обрані PROTAC були розглянуті та протестовані у дозовій відповіді на здатність утворювати тернарний комплекс між CRBN/DDB1 і BRD4 (домен BD1) за допомогою біохімічного тесту TCF TR-FRET. Відомий деградор dBET1 використовувався як контрольний аналіз. Значення EC₅₀ для двох протестованих PROTAC були нижчими за 35 nM. Варто зазначити, що PROTAC 1a продемонстрував EC₅₀ та EC_max нижчі за показники референтної сполуки dBET1: 14 nM проти 31 nM і 285 проти 370 nM відповідно. Висновки. Згідно з аналізом формування тригемінального комплексу, синтезований PROTAC 1a є кращим за інструментальну сполуку на основі глутариміду dBET1, що свідчить про те, що хінолінова частина бойової частини CRBN є новим і потужним підходом до розробки PROTAC.