Biopolym. Cell. 1995; 11(3-4):35-41.
Отримання флюоресцентного реагента для твердофазного 5'-мічення олігонуклеотидів та його використання в синтезі флюоресцентно мічених праимерів для плр при детекци ВІЛ-1
1Дубей І. Я., 1Федоряк О. Д., 1Ткачук О. М., 1Федоряк Д. М.
  1. Інститут біоорганічної хімії та нафтохімії НАН України
    вул. Мурманська, 1, Київ, Україна, 02094


Описано препаративний метод синтезу Н-фосфонатного реагента для флюоресцентного мічення олігонуклеотидів безпосередньо в процесі їх твердофазного синтезу. За допо­могою цього реагента синтезовано флюоресцеїн-мічені тимідин та два праймери для ампліфікації дліяики гена HIV-1.


[1] Mundy CR, Cunningham MW, Read CA. Nucleic acids labelling and detection. Essential mol. biol. Ed. TA. Brown. Oxford : IRL, 1991. Vol. 2: 57-109.
[2] Kessler C. General aspects of nonradioactive labelling and detection. Nonradio­ active labelling and detection of biomol. Penzberg, 1992: 1-24.
[3] Koller E. Fluorescent labels for use in biology and biomedicine. Appl Fluoresc Technol. 1989; 1(2):1-8.
[4] Narayanan S. Overview of principles and current uses of DNA probes in clinical and laboratory medicine. Ann Clin Lab Sci. 1992;22(6):353-76.
[5] DNA probes. Eds G. H. Keller, M. M. Manak. MacMillan press, 1993. 656 p.
[6] Ansorge W, Sproat B, Stegemann J, Schwager C, Zenke M. Automated DNA sequencing: ultrasensitive detection of fluorescent bands during electrophoresis. Nucleic Acids Res. 1987;15(11):4593-602.
[7] Loke SL, Stein CA, Zhang XH, Mori K, Nakanishi M, Subasinghe C, Cohen JS, Neckers LM. Characterization of oligonucleotide transport into living cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 1989;86(10):3474-8.
[8] Oligonucleotide synthesis a practical approach. Ed. M. J. Gait. Oxford : ORL press, 1984. 218 p.
[9] Kalashnikov VV, Samukov VV, Shubina TN, Yamshchikov VF. Application of the reverse-phase chromatography in oligonucleotide synthesis. Russian Journal of Bioorganic Chemistry 1983; 9(5):666-72
[10] Froehler BC, Ng PG, Matteucci MD. Synthesis of DNA via deoxynucleoside H-phosphonate intermediates. Nucleic Acids Res. 1986;14(13):5399-407.
[11] Dubey IYa, Ljapina TV, Galkin AP, Fedorjak DM. Obtaining of the highly efficient polymer support for the synthesis of the DNA fragments on the basis on the microspheric silica «Silochrom-2». Biopolym Cell. 1993; 9(4):26-31.
[12] Goodchild J. Conjugates of oligonucleotides and modified oligonucleotides: a review of their synthesis and properties. Bioconjug Chem. 1990;1(3):165-87.
[13] Korshun VA, Berlin YuA. Introduction of nonradioactive reporter groups into synthetic oligonucleotides and their detection. Russian Journal of Bioorganic Chemistry 1994; 20(6):565-616
[14] Beaucage SL, Iyer RP. The Functionalization of Oligonucleotides Via Phosphoramidite Derivatives. Tetrahedron. 1993;49(10):1925–63.
[15] Giusti WG, Adriano T. Synthesis and characterization of 5'-fluorescent-dye-labeled oligonucleotides. PCR Methods Appl. 1993;2(3):223-7.
[16] Haughland RP. Handbook of fluorescent probes and research chemicals. Junction City: Mol. Probes Inc., 1985. 124 p.
[17] Agrawal S, Christodoulou C, Gait MJ. Efficient methods for attaching non-radioactive labels to the 5' ends of synthetic oligodeoxyribonucleotides. Nucleic Acids Res. 1986;14(15):6227-45.
[18] Schubert F, Ahlert K, Cech D, Rosenthal A. One-step labelling of oligonucleotides with fluoresceine during automated synthesis. Nucleic Acids Res. 1990;18(11):3427.
[19] Ou CY, Kwok S, Mitchell SW, Mack DH, Sninsky JJ, Krebs JW, Feorino P, Warfield D, Schochetman G. DNA amplification for direct detection of HIV-1 in DNA of peripheral blood mononuclear cells. Science. 1988;239(4837):295-7.